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蛋白结晶自动化

1.能够进行多种不同方法的加样：气相扩散法（包括坐滴法和悬滴法）； 2.坐滴悬滴蛋白以及筛选液的加样针头为八通道，针头必须可自动清洗重复使用，也必须可自动更换； 3.仪器具有全自动湿度控制功能，仪器内部带有湿度感应器，实时控制湿度，并且软件界面实时显示湿度数据，有效控制样本液体挥发，提高实验可重复性；（gryphon没这个功能） 4.至少有三个微孔板位和一个深孔板位；后期能扩展升级，增加样本池液整板分配功能，可自动从深孔板分配到微孔板。 5.八通道加样头须具备***传感器，确保点样，并有效防止漏点和误操作，更好地适应板面高低不平产生的误差； 6. 大和小加样容量：坐滴盘和悬滴盘：60nL – 1200nL； 7.加样时间：96孔标准盘（坐滴盘和悬滴盘）：≤5分； 8.兼容市面上所有的96孔标准盘（坐滴盘和悬滴盘）； 9.加样精度：无论液体种类和粘度100nl时CV＝５%； 10.加样模式：可以一次吸取多次加样； 11.机械***精度：Z方向=50um； X, Y方向200um； 12.加样区域完全封闭，无外界干扰。

普通蛋白结晶板

在普通24孔板的基础上发展出来用于结晶学研究。透明的PS材料，平整无变形的底提供了优异的光学性能。孔缘突出于板面，减少孔间污染的风险。在“沉滴”（Sitting Drop）中，需要用到“微桥”（Micro-Bridges）,结晶过程中或之后，“微桥”可以转移到另外一个孔。可用VIEWseal?（676070）密封，也可以用盖玻片通过硅油密封每一孔。

用于油下结晶（Microbatch）,梯形的孔形可将样品溶液集中于孔*，平的底部可在显微镜下观察结晶的生长。

蛋白质晶体板制作

设计并制作了一种在微腔中对蛋白质进行微批量法(microbatch)结晶的碟式微流控结晶芯片,它是一种高通量、低成本、低耗样量(纳升级)、操作简便的蛋白质结晶筛选方法,这种芯片能成功地结晶溶菌酶(lysozyme)和青色荧光蛋白(CyPet).为了系统地比较这种微流控芯片与传统的使用蒸汽扩散法的24孔结晶板的结晶能力,用3个Hampton结晶***盒,在4℃及20℃培养条件下分别对5种标准蛋白(溶菌酶(lysozyme)、木聚糖酶(xylanase)、脂肪酶B(lipase B)、葡萄糖异构酶(glucose isomerase)和嗜热菌蛋白酶(thermolysin))进行了结晶筛选实验.结果表明,在4℃时微流控芯片与24孔结晶板有相近数目的结晶条件(91 vs 98)。

蛋白质晶体板

因而形核剂的使用对于难结晶蛋白或者起始浓度过低的蛋白质结晶具有重要意义.随着结构生物学的发展,形核剂在蛋白质结晶中的研究仍是结晶方法学领域的热点问题.多孔微球对蛋白质分子的吸附作用有利于无序蛋白质分子团簇的形成,进而促进蛋白质形核.添加多孔微球不但可以增加结晶条件筛选数。

综述了杂质对蛋白质晶体生长影响研究领域的进展情况, 对可能的杂质来源以及杂质对结晶过程的影响进行了介绍,***介绍了和结晶蛋白质分子结构相似的杂质分子的影响, 包括晶体成核、生长形态、表面形貌、生长动力学、质量等,以及杂质在晶体中的重新分配。