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蛋白质结晶方法

液-液扩散(Liquid–Liquid Diffusion) 这种方法中，蛋白质溶液和含有沉淀剂的溶液是彼此分层在一个有小孔的毛细管中，一个测熔点用的毛细管一般即可（如图1.2）。下层是密度大的溶液，例如铵或PEG溶液。如果如MPD被用作沉淀剂，它会在上层。以1：1混合，沉淀剂的浓度应该是所期终浓度的二倍。两种溶液（各自约5μl）通过针头导入毛细管，先导入下层的。通过一个简易的摇摆式离心机去除气泡。再加入上层，进而两层之间形成一个明显的界面，它们会逐渐彼此扩散。 Garc′?a-Ruiz and Moreno（1994）已经发展液-液扩散技术至法。蛋白质溶液通过毛细力被吸入狭窄的管中，管的一端是封闭的。接着，开放端入置于小容器的凝胶中，凝胶使得管竖直，蛋白质溶液与凝胶接触。含有沉淀剂的溶液被倒在凝胶上，整个装置被保存于封闭的盒子以防蒸发。沉淀剂通过凝胶和毛细管的扩散时间可以由毛细管插入凝胶的深度控制，从而蛋白质溶液中即可形成过饱和区域，毛细管底部高而顶部低。这也可作为一个筛选佳结晶条件的额外信息。

蛋白质晶体板介绍使用

通过红外光谱,扫描电镜,X射线衍射对产物的晶型,形貌及物相进行了详细表征,初步探讨了文石晶体形成机理及生长机理。本文研究的主要内容及所获得的结论如下:1.常温常压下,以竹蛏韧带纤维状蛋白质为基底,采用气体扩散法可以在较大的条件范围内合成出纯文石晶体:即稀***浓度0.1mol-L-1,NH4HCO3粉末19.0g,C***2浓度0.9-9.0mmol·L-1,溶液高度10-30mm,反应温度20-30℃,结晶时间3-12小时。而空白对照(以玻璃盖玻片为基底)制备出的晶体主要为菱形方解石,还有少量文石和球文石。

蛋白结晶板

以蛋白质晶体学为主要手段的结构***组学研究通常包括选靶、、表达、纯化、晶体筛选与优化、X射线衍射数据收集与结构解析等步骤。其中,获得满足衍射数据收集要求的高质量蛋白晶体是大的"瓶颈"。我们在人类细胞内氯离子通道蛋白2(CLIC2)结构与功能研究中发现用5,5'二硫双-2-甲酸(处理,可以显著提高CLIC2晶体质量,成功收集了分辨率至2埃的衍射数据***作为一个检测巯基化合物的经典***,通常用在半胱氨酸或含量测定上。在蛋白晶体学领域里以获得蛋白晶体为目的的***修饰例子实际并不多。我们将其应用在蛋白结晶学领域,使用Ellman***修饰方法使蛋白晶体质量得到有效改善。