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蛋白质结晶涉及四个重要步骤

1. 蛋白质纯度的确定。如果不够非常纯，必须要进一步纯化。

2. 蛋白质溶解于合适的溶剂中，从中它能通过一种盐或有机化合物而析出。溶剂通常是水-缓冲剂溶液，有时加，如2--2，4-（MPD）。正常情况下，沉淀剂也被加入，但是浓度不高于使沉淀产生。对于不溶于水-缓冲剂或水-的膜蛋白，还需要加入去污剂。

3. 使溶液过饱和。在这一步中，小聚集体形成，它是晶体生长所需的核。对小分子的结晶来说，相比于蛋白质更为人熟知，晶核的自发形成需要提供表面张力能。一旦这个能障被突破了，晶体开始生长。能障在高水平的过饱和度时很容易克服。因此，在高过饱和度时，晶核更易自发形成。晶核的形成可作为一个过饱和度和其他参数的函数通过多种方法来研究，包括光散射、荧光去极化及电子显微镜。

4. 一旦晶核形成，晶体生长正式开始。对低分子量的化合物而言，新分子会逐步结合到正在生长的晶体表面。这是由于这些位置的结合能比较大，相对于分子结合到平滑的表面。这些步骤要么由晶系缺陷造成，要么发生在表面随机形成的晶核。

蛋白结晶板作用

随着人类***组测序计划的完成 ,鉴定细胞内蛋白质表达,结构,功能及相互作用方式等成为后***组时代的主要目标之一.为此 ,需要高通量的蛋白质组学研究的技术和方法.近年来出现的表面增强激光解吸 /电离，蛋白质芯片技术是一种操作简单 ,方便快捷 ,样本需要量少 ,敏***高 ,特异性强的高通量的研究蛋白组学的方法 ,在蛋白质功能分析,标志物筛选,研发等方面具有广泛的应用前景。

蛋白结晶板

但主要是嗜热菌蛋白酶的结晶条件数显著减少,其他4种蛋白在两种方法上均有相近的结晶条件数,表明微流控芯片能以接近24孔结晶板的效率进行蛋白质结晶筛选.但是,在4℃时微流控芯片与24孔结晶板有60%的结晶条件不同,20℃时有90%的结晶条件不同,这表明目前的这种微流控芯片还不能直接代替传统的24孔结晶板,它可以作为蛋白质结晶筛选时的一种补充方式。

技术成为目前迅速发展的前沿领域之一,是化学科学和生命科学分析研究的重要技术平台.微流控技术高通量,低消耗和低成本的特点使其在蛋白质结晶条件筛选和优化方面展示了良好的应用前景.本文对应用于蛋白质结晶的各种微流控芯片技术的原理和方法进行了综述,并对目前几种商业化和文献报道的典型蛋白质结晶微流控系统进行了介绍和比较.

蛋白质晶体板

进而进行衍射得到蛋白质结构相关信息.蛋白质结晶需要经历从未饱和区经亚稳区至形核区的形核过程以及从形核区到亚稳区的生长成熟过程.在整个蛋白质结晶过程中,形核过程是至关重要的一步，形核势垒低.因而形核剂的使用对于难结晶蛋白或者起始浓度过低的蛋白质结晶具有重要意义.随着结构生物学的发展,形核剂在蛋白质结晶中的研究仍是结晶方法学领域的热点问题。