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蛋白结晶自动化

1.能够进行多种不同方法的加样：气相扩散法（包括坐滴法和悬滴法）； 2.坐滴悬滴蛋白以及筛选液的加样针头为八通道，针头必须可自动清洗重复使用，也必须可自动更换； 3.仪器具有全自动湿度控制功能，仪器内部带有湿度感应器，实时控制湿度，并且软件界面实时显示湿度数据，有效控制样本液体挥发，提高实验可重复性；（gryphon没这个功能） 4.至少有三个微孔板位和一个深孔板位；后期能扩展升级，增加样本池液整板分配功能，可自动从深孔板分配到微孔板。 5.八通道加样头须具备***传感器，确保点样，并有效防止漏点和误操作，更好地适应板面高低不平产生的误差； 6. 大和小加样容量：坐滴盘和悬滴盘：60nL – 1200nL； 7.加样时间：96孔标准盘（坐滴盘和悬滴盘）：≤5分； 8.兼容市面上所有的96孔标准盘（坐滴盘和悬滴盘）； 9.加样精度：无论液体种类和粘度100nl时CV＝５%； 10.加样模式：可以一次吸取多次加样； 11.机械***精度：Z方向=50um； X, Y方向200um； 12.加样区域完全封闭，无外界干扰。

蛋白质结晶方法

液-液扩散(Liquid–Liquid Diffusion) 这种方法中，蛋白质溶液和含有沉淀剂的溶液是彼此分层在一个有小孔的毛细管中，一个测熔点用的毛细管一般即可（如图1.2）。下层是密度大的溶液，例如铵或PEG溶液。如果如MPD被用作沉淀剂，它会在上层。以1：1混合，沉淀剂的浓度应该是所期终浓度的二倍。两种溶液（各自约5μl）通过针头导入毛细管，先导入下层的。通过一个简易的摇摆式离心机去除气泡。再加入上层，进而两层之间形成一个明显的界面，它们会逐渐彼此扩散。 Garc′?a-Ruiz and Moreno（1994）已经发展液-液扩散技术至法。蛋白质溶液通过毛细力被吸入狭窄的管中，管的一端是封闭的。接着，开放端入置于小容器的凝胶中，凝胶使得管竖直，蛋白质溶液与凝胶接触。含有沉淀剂的溶液被倒在凝胶上，整个装置被保存于封闭的盒子以防蒸发。沉淀剂通过凝胶和毛细管的扩散时间可以由毛细管插入凝胶的深度控制，从而蛋白质溶液中即可形成过饱和区域，毛细管底部高而顶部低。这也可作为一个筛选佳结晶条件的额外信息。

蛋白质结晶涉及四个重要步骤

1. 蛋白质纯度的确定。如果不够非常纯，必须要进一步纯化。

2. 蛋白质溶解于合适的溶剂中，从中它能通过一种盐或有机化合物而析出。溶剂通常是水-缓冲剂溶液，有时加，如2--2，4-（MPD）。正常情况下，沉淀剂也被加入，但是浓度不高于使沉淀产生。对于不溶于水-缓冲剂或水-的膜蛋白，还需要加入去污剂。

3. 使溶液过饱和。在这一步中，小聚集体形成，它是晶体生长所需的核。对小分子的结晶来说，相比于蛋白质更为人熟知，晶核的自发形成需要提供表面张力能。一旦这个能障被突破了，晶体开始生长。能障在高水平的过饱和度时很容易克服。因此，在高过饱和度时，晶核更易自发形成。晶核的形成可作为一个过饱和度和其他参数的函数通过多种方法来研究，包括光散射、荧光去极化及电子显微镜。

4. 一旦晶核形成，晶体生长正式开始。对低分子量的化合物而言，新分子会逐步结合到正在生长的晶体表面。这是由于这些位置的结合能比较大，相对于分子结合到平滑的表面。这些步骤要么由晶系缺陷造成，要么发生在表面随机形成的晶核。

蛋白结晶板过程实验

蛋白结晶板过程是一种重要的分离过程单元操作,由于机理的复杂性以及动态特性使得该过程的数学模型研究非常具有挑战性.本文从间歇结晶过程建模和动态模拟,动态优化,模型辨识以及鲁棒优化与控制等方面,介绍了间歇结晶过程数学模型的研究进展,评述了其中的关键问题和求解技术.指出对结晶过程的机理进一步深入认识,开发数值稳定,精度更高的求解算法是间歇结晶过程数学模型研究的基础.全局优化效果较好的进化算法和模型预测控制理论在结晶过程动态优化和质量控制中的应用是今后的研究方向。