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蛋白质结晶原理

蛋白质的X射线结构分析首先要获得合适的单晶。蛋白质结晶学尚未发展成熟，尽管很受人亲睐，特别是受航天飞机中微重力实验 的激发。蛋白质结晶是一个反复试验的过程，蛋白质逐渐会从溶液中析出，杂质、晶核及其他未知因素对此过程有所影响。通常，蛋白质越纯，生长晶体几率越大。蛋白质结晶学者对蛋白质的纯度要求要严于生化学家的要求，后者往往在酶催化活性足够高时就很满意。另一方面，为了使蛋白质结晶，不仅要加其他成分，所有蛋白质分子的表面性质也必须是相同的，特别是表面的电荷分布，因为它影响晶体内分子的聚集。质谱是蛋白质结晶中的一种有效工具，例如检测重组蛋白的表达、样品纯度、重原子衍生物及蛋白质结构的特性。

蛋白结晶板使用

蛋白质是水产品的主要组分,其含量测定在水产品加工及研究等方面应用极为广泛.目前,各蛋白含量快速测定方法通常是在试管中进行反应并应用分光光度计测定,其操作过程较繁琐,分析大批量样品时效率低,上述缺点在高通量筛选、检测等场合尤为突出.为了克服该不足,实现蛋白含量的快速高通量测定,本研究基于Folin-酚法,利用96孔板作为反应器并配合比色,建立了一种蛋白含量测定的微孔板方法并评价其合理性.该法测得样品的蛋白含量与常规法结果无显著性差异,反应在30-90 min显色稳定,标准曲线的线性相关系数R2=0.9922,标准偏差范围为0.07%-0.78%,检测限为10 μg.与常规法相比,微孔板法保持了Folin-酚法的准确性及稳定性,同时具有通量高、节省样品、***及测定时间等优点,在蛋白高通量快速测定方面更具优势。

蛋白结晶板

以蛋白质晶体学为主要手段的结构***组学研究通常包括选靶、、表达、纯化、晶体筛选与优化、X射线衍射数据收集与结构解析等步骤。其中,获得满足衍射数据收集要求的高质量蛋白晶体是大的'瓶颈'。我们在人类细胞内氯离子通道蛋白2(CLIC2)结构与功能研究中发现用5,5'二硫双-2-甲酸(处理,可以显著提高CLIC2晶体质量,成功收集了分辨率至2埃的衍射数据***作为一个检测巯基化合物的经典***,通常用在半胱氨酸或含量测定上。在蛋白晶体学领域里以获得蛋白晶体为目的的***修饰例子实际并不多。我们将其应用在蛋白结晶学领域,使用Ellman***修饰方法使蛋白晶体质量得到有效改善。